Untersuchungen über Aminosäuren, Polypeptide und Proteine (1899-1906) / von Emil Fischer.

Emil Fischer

Date:: 1906

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Credit: Untersuchungen über Aminosäuren, Polypeptide und Proteine (1899-1906) / von Emil Fischer. Source: Wellcome Collection.

757/794 (page 741)

Experimenteller Teil. Für die Hydrolyse wurden 1000,0 g bei 100° getrocknetes Pferde- oxyhämoglobin verwandt. Dasselbe war nach der Methode von Zinoffsky-Abderhalden1) dargestellt und zweimal umkristallisiert worden. Nach 6-stündigem Kochen des genannten Materials mit 3000 g rauchender Salzsäure vom spezifischen Gewicht 1,19 am Rückfluß - kühler wurde die Lösung in der bekannten Weise bei 10 mm Druck zum Sirup eingedampft, der Rückstand in absolutem Alkohol (3000 g) gelöst, mit gasförmiger Salzsäure gesättigt, und um das bei der Veresterung sich bildende Wasser möglichst zu entfernen, der ganze Prozeß wieder- holt. Nach nochmaligem Eindampfen wurden die Ester durch Zusatz von Äther, Kaliumcarbonat und sehr konzentrierter Natronlauge unter starker Kühlung isoliert. Die fraktionierte Destillation erfolgte zunächst aus dem Wasser- bade bei 10 mm Druck und nachher bei 0,2 mm Druck wiederum zuerst aus dem Wasserbad und zum Schluß aus dem Ölbad. Hierbei wurden folgende Fraktionen erhalten: 1. Fraktion: bis 40° (Temp. der Dämpfe gemessen) bei 10 mm Druck 45,0 g 2. „ 40- 60« ( >f „ „ „ ) „ 10 „ „ 69,5 „ 3. ,, 100° ( ,, des Wasserbades ,, ) ,, 0,2,, ,, 240,2 ,, 4. „ 100—130° ( „ „ Ölbades „ ) „ 0,2 „ „ 52,5 „ 5. „ 130—160° ( „ „ „ „ ) „ 0,2 „ „ 56,1 „ Im Destillationskolben blieb eine dunkelrot gefärbte, beim Er- kalten erstarrende Masse zurück. Dieselbe löste sich leicht in siedendem absoluten Alkohol. Nach Entfärbung der dunkelrot gefärbten Lösung mit Tierkohle und Einengen derselben schieden sich voluminöse Kristall- massen aus. Dieselben schmolzen bei 296° und erwiesen sich als Leucin- imid. Isoliert wurden 5,5 g. 0,1145 g Substanz gaben 0,2672 g C02 und 0,0991 g HzO. Berechnet für C12H22N202: Gefunden: 63,71% C und 9,73% H. 63,65% C und 9,70% H. Die beim Ausäthern2) der Ester zurückbleibende dickbreiige Masse wurde in Wasser gelöst, mit Salzsäure schwach übersättigt und auf dem Wasserbad eingeengt. Von Zeit zu Zeit wurden die aus- kristallisierenden Salze abfiltriert. Der zuletzt übrig bleibende dicke, dunkelgefärbte Sirup wurde mit dem gleichen Volumen Alkohol, der 1) Emil Abderhalden, Resorption des Eisens usw. Zeitschr. f. Biologie 39, 143 [1901]. Nach der angeführten Methode erhält man ca. 80% der theoretisch berechneten Ausbeute an reinem Oxyhämoglobin. 2) Emil Fischer, Uber eine neue Aminosäure aus Leim. Berichte d. d. ehern. Gesellsch. 35, 2660 [1902]. (S. 680.)